用ImageJ对条带进行定量分析 | Public Library of Bioinformatics (plob.org)
3分钟Get!大牛教你用 image J 对Western blot 条带进行灰度分析! - 哔哩哔哩 (bilibili.com)
科研人员做的western blot实验一般需要对其结果扫描后进行灰度分析,一般使用的软件为Image 。
采用Image J 软件对蛋白质印迹实验结果(Western Blot)进行灰度半定量分析,是分子生物学实验中比较常用的方法,可实现对WB实验结果进行准确、简单和快速的分析。
一:ImageJ分析Westernblot条带图
Step 1:打开Image J, 导入图片→Image→Type→8 bit
Step 2:选择工具框中第一个矩形框选项,选中所有的条带
Step 3:点击Analyze→Gels→Plot Lanes
Step 4:选用工具框中的直线工具,将开口波峰封闭
Step 5:选用工具框中的魔棒工具,点击相应的波峰,相应area值
二:ImageJ分析Westernblot条带图
Step 1:打开Image J, 导入图片。Image→Type→8 bit
Step 2:扣除背景P→rocess→Subtract Background→选择50 pixels和Lightbackground
Step 3:设定参数→Analyze→Set Measures→按照下图勾选参数
Step 4:设定参数→Analyze→Set scale→unit of length选项改为pixels
Step 5:图像分割→Edit→Invert→选用椭圆或自定义工具选中条带
Step 6:Analyze→Measure→得到 IntDen值
Step 7:重复Step5、6,得到所有条带的IntDen值
强烈建议多看几遍,毕竟啊,知识它有时候太难进脑子。
(这样.....也行叭)